Enzymimmunoassay (ELISA) zur semi-quantitativen Bestimmung von IgM anti-Beta 2 Glykoprotein l (β₂GPl) Antikörpern in Humanserum oder zitriertem Plasma (3,2% Natriumzitrat).

Testprinzip

Der Test wird als indirekter ELISA durchgeführt. Verdünnte Serum- oder Plasmaproben, Kalibratorseren und Kontrollen werden in mit gereinigtem humanem β₂GPl beschichteten Mikrovertiefungen inkubiert. Durch die Inkubation können die in den Proben vorhandenen Anti-β₂GPl-Antikörper mit dem immobilisierten Antigen reagieren. Nach der Entfernung ungebundener Serum- oder Plasmaproteine durch Waschen werden mit Meerrettichperoxidase (HRP) markierte, für humanes IgM spezifische Antikörper zugegeben, die mit den gebundenen β₂GPl-Antikörpern Komplexe bilden. Nach einem weiteren Waschschritt wird das gebundene Enzym-Antikörper-Konjugat durch Zugabe einer einzigen Lösung, die Tetramethylbenzidin (TMB) und Wasserstoffperoxid (H₂O₂) als chromogenes Substrat enthält, untersucht. In den Vertiefungen entwickelt sich eine Farbe, deren Intensität proportional zur Serumkonzentration der Anti-β₂GPl-Antikörper ist. Die Ergebnisse werden durch Ablesen der optischen Dichte (Absorption) jeder Vertiefung in einem Spektralphotometer ermittelt. Es werden Kalibrierseren mit den IgM-β₂GPl-Antikörperkonzentrationen in M-Einheiten mitgeliefert. Für die Mehrpunktkalibrierung führen Sie eine lineare Regressionsanalyse mit den Kalibratorwerten gegen die Kalibrator-O.D.s durch. Kontrollen und Patientenergebnisse werden anhand der Kalibrierungskurve bestimmt.

Reagenzien und Haltbarkeit (nach Öffnung)

Die Reagenzien sind bei 2-8°C bis zum angegebenen Verfallsdatum haltbar. Nicht einfrieren!